清道夫受體SR-A在天然免疫中的作用及其機制探討

雖然大量研究證實，SR在介導動脈粥樣硬化形成中發(fā)揮至關(guān)重要的作用，近年來越來越多的研究也顯示，巨噬細胞表面SR-A也是天然免疫系統(tǒng)中的重要受體分子，與宿主防御功能密切相關(guān)，主要表現(xiàn)為：

（一）結(jié)合病原菌及其毒素

研究表明，細菌LPS及其類似物ReLPS和Lipid 1VA都能與ac-LDL或ox-LDL競爭結(jié)合SR，ac-LDL或ox-LDL能減少血循環(huán)中LPS的清除。可溶性牛SR-A能直接識別多種革蘭陽性細菌，如釀膿鏈球菌、金黃色葡萄球菌、單核細胞增多性李斯特菌，其結(jié)合作用能被LTA抑制，說明SR結(jié)合完整的細菌至少部分是由LTA介導的。

SR-A對細菌及其內(nèi)、外毒素的結(jié)合不依賴于血清或脂多糖結(jié)合蛋白。上述結(jié)果說明SR-A具有模式識別分子的結(jié)合特征。體內(nèi)SR-A的表達分布顯示，SR-A在肝枯否細胞﹑肺泡巨噬細胞、腸道固有層巨噬細胞呈高表達，脾臟紅髓和邊緣區(qū)巨噬細胞、胸腺髓質(zhì)和淋巴結(jié)包膜下區(qū)的巨噬細胞呈低表達。在成年小鼠大腦，SR-A主要分布于脈絡(luò)膜叢的巨噬細胞和腦脊膜的巨噬細胞上。小膠質(zhì)細胞不表達SR-A受體。海馬內(nèi)注射LPS后24h，可檢測出SR-A在小膠質(zhì)細胞上的表達。SR-A主要在巨噬細胞表面的分布特征也進一步說明了SR-A在細胞防御中的重要作用，因為巨噬細胞具有強吞噬特性和免疫監(jiān)視作用。

（二）吞噬作用與抗原提呈作用

對微生物的吞噬作用是宿主抵抗細菌感染的關(guān)鍵因素。其機制主要有兩個方面：調(diào)理素依賴性和調(diào)理素非依賴性吞噬作用。在調(diào)理素依賴性吞噬作用中，免疫球蛋白或補體分子結(jié)合微生物，隨后通過吞白細胞上的Fc或補體受體促進微生物攝入。在調(diào)理素非依賴性吞噬作用中，微生物表面上的配體分子則直接被吞噬細胞漿膜上的模式識別受體識別。

關(guān)于SR-A對巨噬細胞吞噬活性的介導作用，首先觀察其對凋亡胸腺細胞的攝入。研究顯示，抗小鼠SR-A抗體2F8能抑制胸腺巨噬細胞和腹腔巨噬細胞對凋亡胸腺細胞的攝入，使其攝取量減少50%。SR-A-/-小鼠的胸腺巨噬細胞也顯示出對凋亡胸腺細胞攝入減少50%。將正常無吞噬作用的細胞表達SR-A，可使其具有攝入調(diào)亡細胞的能力。隨后研究也發(fā)現(xiàn)，SR-A也能介導巨噬細胞對細菌的吞噬作用。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將SR-A基因轉(zhuǎn)入CHO或HEK293細胞內(nèi)，細胞則能結(jié)合和攝入熒光標記的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。包被LPS或1TA的顆粒也能被轉(zhuǎn)染SR-A的CHO細胞結(jié)合和內(nèi)移。

SR-A-/-小鼠腹腔巨噬細胞攝入細菌的量較野生型減少40%。說明巨噬細胞表面SR-A是調(diào)控細胞吞噬功能的重要受體。SR-A對細胞吞噬功能的調(diào)控作用與多種因素有關(guān)，如調(diào)理素、巨噬細胞來源﹑激活狀態(tài)和培養(yǎng)條件。細菌株也是個重要的影響因素，如有莢膜大腸桿菌K1較無莢膜K12或DH5α菌株更易攝入。證明SR-A參與宿主防御作用最有力的證據(jù)是來源于SR-A-/-小鼠的體內(nèi)研究。

研究顯示，SR-A-/-小鼠對單核細胞增多性利斯特細菌、DNA病毒感染的易感性明顯增加。雖然野生型和SR-A-/-小鼠均顯示快速從循環(huán)內(nèi)清除單核細胞增多性利斯特菌，但是，在感染后24和96h，SR-A-/-小鼠肝、脾內(nèi)細菌數(shù)明顯高于野生型。SR-A-/-小鼠對金黃色葡萄球菌腹腔內(nèi)感染的易感性也明顯增加。盡管動物中性粒細胞對金黃色葡萄球菌的殺滅作用正常，但動物清除感染部位細菌的能力明顯下降，動物最終死于彌漫性腹腔感染。另外，SR-A-/-小鼠較野生型更易發(fā)生內(nèi)毒素休克。這說明組織巨噬細胞表面SR-A在介導細菌吞噬﹑清除細菌及其毒素方面發(fā)揮了重要作用。

有研究顯示，巨噬細胞表面MARCO也具有結(jié)合革蘭陰性和革蘭陽性細菌的能力，這種結(jié)合作用能被經(jīng)典的SR抑制劑或特異性抗MARCO抗體阻斷，但其介導細菌的吞噬作用尚待進一步證明，因為CHO轉(zhuǎn)染體僅結(jié)合細菌，未見將細菌攝入到胞內(nèi)。

（三）黏附作用

巨噬細胞能黏附到許多表面，而且不易從培養(yǎng)皿上脫落。與其他許多細胞系不同，有EDTA（二價離子螯合物，能阻斷整合素介導的黏附作用）存在時，巨噬細胞仍能黏附到塑料培養(yǎng)皿（tissue culture plastic，TCP）。Fraser等報道，在 EDTA和血清存在時，巨噬細胞與TCP的黏附作用能被抗SR-A單克隆抗體2F8阻斷。免疫熒光染色顯示，SR-A分布于黏附側(cè)的細胞膜上。此外，有研究顯示，SR-A能促使巨噬細胞黏附到被糖化（glycation）修飾的Ⅳ膠原包被的表面上。說明SR-A參與介導巨噬細胞的黏附作用，這可能對于促進巨噬細胞在感染部位的防御和免疫功能具有重要意義。

（四）下調(diào)炎癥反應(yīng)

與LPS其他受體不同，SR-A與LPS結(jié)合后，迅速經(jīng)細胞的攝粒作用，將LPS內(nèi)移到溶酶體內(nèi)，經(jīng)脫磷酸和脫酰基作用，內(nèi)毒素被降解和滅活，在此過程中并不引起巨噬細胞激活，如釋放TNFα等炎癥介質(zhì)。我們也研究發(fā)現(xiàn)，利用氧化型低密度脂蛋白或抗SR單抗預(yù)處理枯否細胞，能明顯增強LPS激活細胞的作用，抗CD14單抗則能明顯抑制氧化型低密度脂蛋白的增敏作用。用LPS刺激轉(zhuǎn)染SR-A的HEK293細胞也不引起胞內(nèi)NF-κB活化。最近研究進一步顯示，SR-A缺陷小鼠對LPS的敏感性明顯高于野生型，表現(xiàn)為動物病死率、體內(nèi)細胞因子水平，如TNFα、IL-6等明顯高于對照組。上述結(jié)果說明，SR-A是一種重要的防御性受體，其對LPS的清除作用可能是機體防止感染時炎癥反應(yīng)過度的重要內(nèi)源性機制。

（五）啟動獲得性免疫反應(yīng)

除參與天然免疫作用外，SR-A也可能參與啟動獲得性免疫反應(yīng)。研究表明，SR介導的吞噬作用同時也引起特異性修飾抗原提呈給T細胞，使其分泌高水平的IFNY、產(chǎn)生低水平的IL-4和IL-10，提呈給B細胞，則產(chǎn)生拮抗病原菌或其毒素的特異性抗體。在動脈粥樣斑塊內(nèi)存在T細胞和特異性識別被修飾LDL表型的抗體。說明SR-A也可能在獲得性免疫中發(fā)揮重要作用。