內(nèi)毒素血癥時氧自由基產(chǎn)生的證據(jù)

自由基在內(nèi)毒素血癥中對各組織細胞損傷的作用已被廣泛而深入地研究。盡管對內(nèi)毒素血癥時自由基損傷的程度尚未得出最后結(jié)論，但許多研究已證實，自由基確實參與了內(nèi)毒素血癥的組織損傷作用。目前研究自由基是否參與某一疾病的措施主要有兩個，即：①直接分析組織和血漿中的自由基。②采用自由基清除劑及抗氧化劑。

一、直接測定

由于氧自由基的半衰期甚短，因而使直接測定組織或血漿中的自由基非常困難。Baldwin報道，采用直接測定法測得急性肺損傷患者組織H2O2水平明顯升高。之后，Sznajder等也報道腦損傷及敗血癥患者血漿中的H2O2水平也增高。

二、間接測定

由于直接測定自由基困難復(fù)雜，因此人們常應(yīng)用間接測定法來研究氧自由基。因為體內(nèi)到處均存在著抗氧化系統(tǒng)，而自由基的產(chǎn)生必須伴有體內(nèi)抗氧化劑的減少，因此分析體內(nèi)抗氧化劑的含量同樣能推斷自由基產(chǎn)生的量。

1．抗氨化劑分析結(jié)果

最有代表性的抗氧化劑是維生素E，抗休克成功者休克模型中發(fā)現(xiàn)維生素E水平可回升至正常水平。Takeda等對重危手術(shù)患者的研究表明，患者血漿維生素E水平為5~6mg/L，與維生素E缺乏患者的水平相似。另外，研究者還發(fā)現(xiàn)﹐硫-巴-比-妥-酸反應(yīng)物（thiobarbituric-acid-reactive substances，TBAR-S）的血漿水平與脂過氧化反應(yīng)一致。急性肺損傷患者中也發(fā)現(xiàn)了類似情況。有報道，嚴重?zé)齻颊哐獫{中的5，5-二硫-2-硝基苯酸反應(yīng)物（5，5-dithio-nitrobenzoic-acid-reactive substance，DINB）疏基及維生素E水平均下降。敗血癥及MODS患者的血漿酮蛋白水平降低、TBAR-S水平增加。

2脂過氨化產(chǎn)物測定

氧自由基能攻擊生物膜磷脂中的多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）而引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并形成脂質(zhì)過氧化物（lipid peroxide，ROOH），其中最主要的是氫過氧化物和內(nèi)過氧化物。在過氧化條件下，脂質(zhì)過氧化物極不穩(wěn)定，能分解成一系列復(fù)雜產(chǎn)物，包括氧自由基。因此，應(yīng)同時監(jiān)測數(shù)種產(chǎn)物。除乙醛外，估計磷脂上的羥基也是脂質(zhì)過氧化的指標之一。創(chuàng)傷、燒傷患者及動物模型的血及組織中的脂過氧化產(chǎn)物可有增加。大鼠注射內(nèi)毒素后，血漿中TBAR-S水平暫時升高。Peavy及Fairchild發(fā)現(xiàn)，在內(nèi)毒素注射后，小鼠有TBAR-S水平增高，其呼出的氣體中有乙烷。內(nèi)毒素血癥綿羊的動脈血中有結(jié)合雙烯（conjugated dienes）水平增加，但在靜脈血中卻未見有雙烯水平增加。注射高劑量內(nèi)毒素后，綿羊肺組織中有TBAR-S的增加，但低劑量及中等劑量內(nèi)毒素則不引起肺組織TBAR-S水平的變化。重?；颊撸貏e是伴有ARDS的患者血中H2O2濃度則增加。

三、氧自由基清除劑應(yīng)用后的證據(jù)

由于直接或間接測定氧自由基困難，多數(shù)提示氧自由基參與各疾病的組織損傷證據(jù)均來自氧自由基清除劑，即抗氧化劑及離子鰲合劑，因為這兩種酶可防止自由基的連鎖反應(yīng)，但由于其半衰期較短，應(yīng)用時困難較多。研究表明，SOD不能減少低血容量性休克動物的維生素E及疏基水平，不能使增加的TBAR-S水平降低，也不能阻止各組織的損傷。SOD對內(nèi)毒素血癥及敗血癥患者應(yīng)用的結(jié)果不一，許多研究者報道SOD對豬、兔及大鼠的呼吸衰竭無作用，而在綿羊中有進一步使病情惡化的趨勢。相反，另一部分報道認為SOD對內(nèi)毒素誘導(dǎo)的肺水腫大鼠及小鼠有用。過氧化氫酶的作用也是如此，其對綿羊有保護作用，但對山羊則無作用。盡管上述的研究結(jié)果不同，但對脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的檢測則發(fā)現(xiàn)應(yīng)用SOD或過氧化氫酶后可減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。

四、離子螯合劑應(yīng)用后的證據(jù)

由于·OH的生成是金屬依賴性的，因此金屬離子鰲合劑主要應(yīng)用于阻止·OH的產(chǎn)生。盡管許多研究表明離子螯合劑（deferoxamine）對失血性休克有益，能增加實驗狗的生存率，且對其他創(chuàng)傷所致的休克也有一定保護作用，但對內(nèi)毒素血癥及敗血癥的動物則無效。

五、黃嘌哈氧化酶阻滯劑及合成抗氧化劑證據(jù)

研究顯示，別嘌醇（allopurinal）及氧嘌呤醇（oxypurinol）對缺血-再灌注動物有明確的保護作用，可能是減少了氧自由基對肺組織的損傷或阻止了十二烷基釋放的結(jié)果。N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）能保護內(nèi)毒素誘發(fā)的肝損傷，也可能與減少自由基有關(guān)。

總之，氧自由基參與了內(nèi)毒素血癥的組織損傷作用，但其在組織損傷作用中的地位還不甚清楚。